微生物学与免疫学实验教程（普通高等教育“十二五”规划教材·全国高等医药院校规划教_郭焱　等主编_9787302353010

《微生物学与免疫学实验教程》，本书共分免疫学实验、病原微生物学实验、药物微生物鉴定实验、附录四个部分。实验内容与规划教材相匹配，以基本技能实验为主，体现重基础的原则，同时增加了当前免疫学研究常用的前沿技术；实验项目多样化、多层次性，可供不同专业，不同层次授课对像选用；避免了微生物学与免疫学相同技术的重复性；增加了药物微生物鉴定实验，适合医药院校本科、研究生等使用。

　　随着生命科学的发展，微生物学与免疫学已渗透到生命科学的各个领域，成为生命科学及相关学科与科研不可缺少的部分，微生物学与免疫学实验也是医学、药学、生物技术等专业本科学生必修的基础实验课程。为了适应现代科学技术的发展，适应高校教学改革，提高教学质量，培养开拓、创新型高级人才，我们根据多年的教学经验和生命科学发展趋势，在传统微生物学与免疫学实验的基础上，探讨新的实验教学方法，编写了本实验教程。本实验教材可供高等医药院校各专业、各层次学生选用。本实验教程由免疫学实验、病原微生物学实验、药物微生物学检查及附录四个部分组成。第一部分除了介绍免疫学基本技术操作外，还系统介绍了当前免疫学研究常用的免疫荧光、免疫组织化学、免疫印迹、免疫胶体金、化学发光免疫分析等技术的原理、种类、应用和前沿发展状况；第二部分和第三部分所选实验与规划教材相匹配，对每个实验的基本原理、试剂配制、实验步骤、实验器材等都做了较为详细的叙述。通过较系统的训练，培养学生的逻辑思维、综合应用及动手操作能力，建立提高学生实践技能和科研能力培养的课程体系，为今后科研工作打下良好的基础。在编写过程中，我们既要考虑配合课堂理论学习，又要注意训练学生的基本操作和基本技能，同时也增加了反映新技术、新方法的内容。我们力求保证每个实验的科学性、实用性和可靠性，对其中基本原理、试剂配制、实验步骤、实验器材等都做了较为详细的叙述。我们还对常用的实验仪器使用方法、样品的制备、试剂的配制等做了详细的介绍，使学生使用时更方便、易懂。本教材是由编写团队在总结多年微生物与免疫实验教学的基础上，总结经验，不断完善并进一步修订而成的，但由于水平有限，在实验选材、编排上难免有不妥之处，恳请读者在使用中提出宝贵意见。

　　编者2014年1月

第1部分免疫学实验
1抗原抗体反应
1.1凝集反应
实验1直接凝集试验（玻片法）
实验2直接凝集试验（试管法）
附1：间接凝集试验
附2：间接凝集抑制试验
1.2沉淀反应
实验3单向琼脂扩散试验
实验4双向琼脂扩散试验
实验5对流免疫电泳试验
附3：免疫电泳试验
1.3补体测定
实验6补体介导的溶血反应
1.4免疫标记技术

第1部分免疫学实验
1抗原抗体反应
1.1凝集反应
实验1直接凝集试验（玻片法）
实验2直接凝集试验（试管法）
附1：间接凝集试验
附2：间接凝集抑制试验
1.2沉淀反应
实验3单向琼脂扩散试验
实验4双向琼脂扩散试验
实验5对流免疫电泳试验
附3：免疫电泳试验
1.3补体测定
实验6补体介导的溶血反应
1.4免疫标记技术
实验7酶联免疫吸附试验（直接法）
附4：酶联免疫吸附试验（间接法）
附5：酶联免疫吸附试验（夹心法）
实验8间接免疫荧光试验
实验9免疫胶体金试验
2免疫细胞检测技术
2.1免疫细胞的分离
实验10外周血单个核细胞的分离
实验11T、B淋巴细胞的分离
附6：免疫细胞分选（免疫磁珠法）
2.2免疫细胞数量的检测
实验12E花环形成试验
2.3免疫细胞功能的检测
实验13中性粒细胞吞噬功能检测
实验14巨噬细胞吞噬功能检测
实验15淋巴细胞转化试验（MTT法）
附7：淋巴细胞转化试验（3H_TdR标记法）
实验16细胞毒性T细胞杀伤功能测定
实验17NK细胞活性测定
附8：免疫印迹试验
附9：免疫组织化学试验
附10：化学发光免疫分析试验
附11:ELISA法检测HBsAg

第2部分病原微生物学实验
3微生物学基本技能实验
3.1微生物学实验室常用仪器设备
实验18微生物实验常用仪器设备
实验19光学显微镜油镜的使用
3.2细菌形态学检查
实验20细菌的基本形态、特殊结构观察
实验21革兰染色法
实验22细菌动力检查法
3.3细菌的人工培养
实验23制备常用培养基
实验24细菌培养技术
实验25细菌生长现象观察
3.4细菌的生化反应
实验26糖发酵试验
实验27吲哚试验
实验28甲基红（M．R）试验
实验29乙酰甲基甲醇（V-P）试验
实验30柠檬酸盐利用试验
实验31硫化氢试验
实验32硝酸盐还原试验
实验33石蕊牛乳试验
实验34明胶液化试验
3.5细菌的药物敏感性试验
实验35细菌对抗生素的敏感性试验（纸片扩散法）
实验36细菌对中草药的敏感性试验（打孔法）
实验37细菌对中草药的敏感性试验（试管稀释法）
3.6分子微生物学实验
实验38细菌DNA的提取
实验39质粒DNA的提取
实验40DNA重组技术
实验41PCR技术
附12：细菌培养及检测程序
4病原微生物学实验
4.1病原微生物的形态检测
实验42病原性球菌的形态及培养物观察
实验43肠道杆菌的形态及培养物观察
实验44其他病原微生物的形态及培养物观察
4.2病原微生物的其他检测方法
实验45血浆凝固酶试验
实验46抗链球菌溶血素“（）”试验（乳胶凝集法）
实验47肥达反应
实验48结核分枝杆菌抗酸染色法
实验49病毒鸡胚培养法
实验50流感病毒的红细胞凝集试验
附13：粪便标本中肠道杆菌的分离鉴定

第3部分药物微生物学检查
实验51注射药物的无菌检查
实验52口服药物的微生物学检查
实验53外用药物的微生物学检查
实验54细菌内毒素的检测
附14：药品微生物限度检查
附15：土壤中抗生素产生菌的分离

第4部分附录
附录1实验室安全及防护知识
附录2免疫血清制备、鉴定、纯化及保存
附录3常用培养基的制备
附录4常用染色液的配制
附录5常用溶液的配制
附录6微生物菌种的保藏
附录7常用实验动物及基本技术
附录8显微镜技术
参考文献

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