本书为口腔医学实验技术指导系列丛书之一,由口腔疾病研究国家重点实验室专家教授编写,邀请了国内外该领域的学者参与。全书共分为9章,包括牙颌面发育与再生概述、牙颌面发育的基本理论;牙颌面研究基本实验技术;牙颌面干细胞的分离培养技术;牙颌面干细胞体内追踪与鉴定;牙颌面发育异常动物模型;牙颌面再生动物模型;牙颌面发育与肿瘤发生;牙颌面发育的三维成像技术。
①本书主编们均为国家重点实验室和国内外著名口腔院校的知名研究人员,长期工作在口腔医学科学研究的线,他们在口腔医学研究领域颇有建树;②编写时听取了研究生和青年科技工作者对实验技能想了解的相关知识,深入浅出、全面系统地介绍口腔医学实验技术的原理、材料方法、操作步骤、关键注意点等,是编者多年工作经验的总结;③本书内容连贯、体系完整、步骤清楚、文字流畅,图文并茂,适合口腔医学研究生、本科生、规培生、留学生,以及科研工作人员阅读和学习,是一本实用的工具书。
牙颌面发育与再生是口腔医学研究的重要组成部分,主要利用遗传学、组织胚胎学、细胞生物学、分子生物学和影像学等手段,研究牙颌面相关组织或器官的发生、发育和生长的过程和分子调控机制,探讨牙颌面组织缺损处诱导发生骨相关组织或牙相关组织的再生过程,以达到修复因先天遗传或后天损伤所致组织缺损的目的。
牙颌面系统不仅与人类的美观和心理状态联系密切,更担负着人体重要的咀嚼吞咽、言语表情及呼吸等生理功能。在技术创新和信息发达的新时代,人们的个性化需求相应更多元化,对牙颌面健康、舒适度和美学的追求越来越高。近年来,牙颌面发育与再生研究的新技术和新观点不断涌现,成为发展快的研究领域之一。我国在该领域的研究水平和研究规模也不断提高,但目前国内还缺乏专门针对这一领域的实验技术方面的书籍,广大的科研人员和研究生不得不占用大量的精力去查找和摸索实验技术,降低了工作效率。
正是基于上述情况,口腔疾病研究国家重点实验室组织团队编写了《牙颌面发育与再生实验技术》,并邀请了国内外该领域的专家参与。全书共分为十章,重点以小鼠为实验动物模型,介绍牙颌面发育与再生相关的实验技术和研究进展,如牙颌面组织切片与染色技术、牙颌面干细胞的分离培养技术、牙颌面发育异常动物模型、再生动物模型等。同时,我们也尽可能纳入一些前沿的技术,如牙颌面干细胞体内示踪与鉴定、类器官培养、肿瘤干细胞的分选和组织透明化与三维成像技术等。希望本书能够为从事牙颌面发育和再生研究的科研人员和学生提供有价值的参考,并填补国内在此方面的空白。
感谢郭黛墨、张勤、王淦平、王晓晨、宋薇和雷可昕在资料检索和整理中的辛勤工作,感谢张笑涵为本书绘制插图。鉴于编者知识和水平的局限性,加之编写时间仓促,同时还有若干概念和名词存在争议,难免存在错误和疏漏,诚挚地希望广大读者批评指正,谨致谢意。
编 者
2021 年6 月
袁泉,2008年毕业于四川大学华西口腔医学院,获口腔临床医学博士学位。现任四川大学教授、博士生导师、主任医师,华西口腔医学院口腔修复学系主任。日本广岛大学联合培养博士,美国哈佛大学博士后和加州大学洛杉矶分校访问学者。万人计划科技创新领军人才、长江学者奖励计划青年学者、国家自然科学基金优秀青年基金获得者、*新世纪优秀人才、四川省卫健委学术技术带头人。以和通讯作者身份在Nat Comunn、PNAS、EMBO J和JBMR等杂志发表SCI论文40余篇,主编、参编教材/专著7部。担任中国医师协会口腔医师分会口腔种植工作委员会副主任委员,中华口腔医学会口腔种植专业委员会常务委员,中华口腔医学会口腔生物专业委员会委员,四川省口腔医学会口腔种植专业委员会候任主任委员。
章 牙颌面发育的基本理论/ 1
节 颅骨发育的基本理论/ 2
第二节 牙发育的基本理论/ 6
第二章 牙颌面研究常用实验技术/ 15
节 组织切片技术/ 16
第二节 染色技术/ 24
第三节 影像技术/ 42
第四节 生物力学检测技术/ 50
第三章 牙颌面干细胞的体外分离培养/ 58
节 牙囊干细胞的体外分离培养/ 60
第二节 牙髓干细胞的体外分离培养/ 62
第三节 根尖牙乳头干细胞的体外分离培养/ 65
第四节 颌骨骨髓间充质干细胞的体外分离培养/ 67
第五节 牙周膜干细胞的体外分离培养/ 70
第六节 颌骨骨膜干细胞的体外分离培养/ 72
第七节 髁突软骨干细胞的体外分离培养/ 75
第八节 颅缝间充质干细胞的体外分离培养/ 77
第九节 牙上皮干细胞的体外分离培养/ 79
第四章 牙颌面发育与再生实验技术/87
牙颌面干细胞体内示踪与鉴定/ 87
节 转基因小鼠基本理论/ 88
第二节 牙颌面干细胞研究常用转基因工具鼠/ 90
第三节 牙颌面干细胞体内示踪与鉴定技术及其应用/ 94
第五章 牙颌面发育异常动物模型/ 104
节 遗传性牙釉质发育异常动物模型/ 107
第二节 遗传性牙本质发育异常动物模型/ 113
第三节 遗传性牙根发育缺陷/ 120
第四节 牙数目异常/ 124
第五节 唇裂动物模型/ 127
第六节 牙槽突裂动物模型/ 130
第七节 腭裂动物模型/ 132
第八节 Pierre Robin 序列征动物模型/ 135
第九节 颅缝早闭动物模型/ 137
第六章 牙颌面再生动物模型/ 141
节 拔牙创愈合动物模型/ 142
第二节 骨缺损愈合动物模型/ 145
第三节 骨折愈合动物模型/ 150
第四节 种植体骨结合动物模型/ 151
第五节 牙髓再生动物模型/ 155
第六节 牙本质修复动物模型/ 157
第七节 牙周组织缺损与修复动物模型/ 158
第八节 根尖周组织损伤与修复模型/ 161
第九节 颞下颌关节骨关节炎动物模型/ 163
第十节 牵张成骨动物模型/ 166
第十一节 口腔黏膜损伤与修复动物模型/ 169
第七章 牙颌面肿瘤相关技术/ 181
节 牙颌面肿瘤的发生/ 182
第二节 牙颌面肿瘤细胞模型/ 184
第三节 牙颌面肿瘤干细胞的分选/ 190
第四节 牙颌面肿瘤动物模型/ 196
第五节 牙颌面肿瘤研究新技术/ 201
第八章 牙颌面组织透明化与三维成像技术/ 213
节 组织透明化技术/ 214
第二节 透明组织的三维成像技术/ 228
第三节 三维图像处理及数据分析/ 233
第四节 组织透明化技术在种植体周血管三维成像中的应用/ 241
第九章 颌面发育与再生研究进展/ 248
节 颌面发育的分子调控/ 249
第二节 颌面成体干细胞的研究进展/ 265
第三节 颌面再生相关生物支架材料/ 271
第十章 牙发育与再生研究进展/ 288
节 牙发育的分子调控/ 289
第二节 干细胞在牙发育与再生中的作用/ 295
第三节 牙再生的研究进展/ 302